Benzonase Nuclease

Benzonase Nuclease — это рекомбинантный нуклеазный фермент, вырабатываемый из штамма Escherichia coli, трансформированного геном endonuclease I из Serratia marcescens. Фермент катализирует расщепление всех форм ДНК и РНК, включая однонитевые, двухнитевые, линейные и кольцевые молекулы, до олигонуклеотидов длиной в среднем 4–5 нуклеотидов. Benzonase Nuclease активен в широком диапазоне условий, включая высокие концентрации денатурирующих агентов, и не требует специфичных кофакторов, кроме ионов магния. Молекулярная масса фермента составляет приблизительно 26 кДа. Активность Benzonase Nuclease не зависит от последовательности нуклеиновых кислот, что обеспечивает его универсальность в приложениях по удалению нуклеиновых кислот из биопрепаратов. Фермент эффективно снижает вязкость растворов за счёт деградации высокомолекулярных нуклеиновых кислот. Широко используется на стадиях очистки биомолекул, в производстве вакцин, вирусных векторов и рекомбинантных белков. Устойчив к действию протеаз и сохраняет активность в присутствии рядов детергентов. Активность фермента ингибируется хелаторами двухвалентных катионов, такими как ЭДТА. Benzonase Nuclease не содержит следов бактериальных эндотоксинов и других примесей, что делает его пригодным для использования в GMP-процессах. Фермент инактивируется при повышении температуры до 60 °C в течение 15 минут. Его применение позволяет существенно повысить чистоту и стабильность целевых продуктов в биофармацевтических процессах. Benzonase Nuclease характеризуется высокой специфичностью к нуклеиновым кислотам и отсутствием протеолитической активности. Оптимальный pH для активности фермента находится в диапазоне 7,0–9,0. Фермент совместим с различными буферными системами, используемыми в биохимических и биотехнологических протоколах.