Coelenterazine h 2-monooxygenase

Coelenterazine h 2-monooxygenase — это люминесцентный белок, относящийся к классу оксигеназ, способных катализировать окисление коэлентеразина h с испусканием света в диапазоне сине-зелёного света. Фермент встречается у биолюминесцентных морских организмов, включая гидроидных медуз и других представителей типа Cnidaria. Молекулярная масса белка составляет приблизительно 36 кДа, изоэлектрическая точка варьирует в зависимости от изоформы. Кофактором реакции является молекулярный кислород, необходимый для окисления субстрата. Светоиспускание происходит в результате образования возбуждённого состояния оксо-продукта — коэлентерамида. Фермент обладает высокой специфичностью к коэлентеразину h по сравнению с другими аналогами. Активность coelenterazine h 2-monooxygenase зависит от pH, оптимальные значения находятся в диапазоне 7,5–8,5. Белок устойчив к действию протеаз, но чувствителен к температурной денатурации при температурах выше 45 °C. Структурно фермент содержит домен, схожий с доменом «сопровождающих белков» (chaperone-like domain), который, предположительно, участвует в стабилизации третичной структуры. Ген, кодирующий coelenterazine h 2-monooxygenase, может быть экспрессирован в гетерологичных системах, включая Escherichia coli и мембранные системы дрожжей. Изоформы фермента различаются по кинетическим параметрам и спектральным характеристикам. Coelenterazine h 2-monooxygenase применяется в качестве репортерного белка в клеточных и молекулярных исследованиях. Наиболее близкими по функции аналогами являются Renilla luciferase и Oplophorus luciferase. Белок сохраняет активность как в водной, так и в мембраносвязанной среде, что расширяет возможности его использования в биоанализе. Изучение структурно-функциональных свойств coelenterazine h 2-monooxygenase способствует разработке новых чувствительных биолюминесцентных систем.