Taq DNA Polymerase

Taq DNA Polymerase — термостабильный фермент, выделенный из термофильной бактерии Thermus aquaticus, который катализирует синтез комплементарной цепи ДНК в направлении 5′ → 3′ в ходе полимеразной цепной реакции (ПЦР). Фермент проявляет оптимальную активность при температуре около 72 °C, что делает его идеальным для использования в циклических реакциях амплификации. Taq DNA Polymerase обладает полимеразной активностью, а также 5′ → 3′ экзонуклеазной активностью, но не имеет 3′ → 5′ экзонуклеазной (корректирующей) активности, что определяет его относительно высокую частоту ошибок при встраивании нуклеотидов. Молекулярная масса фермента составляет приблизительно 94 кДа. В присутствии ионов магния (Mg²⁺) и дезоксинуклеозидтрифосфатов (dNTP) фермент эффективно инициирует синтез ДНК на матрице с праймерами. Taq DNA Polymerase широко применяется в молекулярной биологии для амплификации ДНК, анализа генов, клонирования и диагностики инфекционных заболеваний. Его термостабильность позволяет избежать добавления свежей порции фермента на каждой цикл ПЦР. Фермент не обладает активностью обратной транскриптазы и не может использовать РНК в качестве матрицы. Стабильность и высокая производительность Taq DNA Polymerase сделали его стандартом в протоколах ПЦР. Фермент ингибируется пирофосфатами, гепарином и высокими концентрациями солей. Активность фермента сохраняется длительное время при хранении при -20 °C в буфере, содержащем глицерин. Taq DNA Polymerase не требует кофакторов, кроме двухвалентных катионов, преимущественно Mg²⁺. Фермент активен в широком диапазоне pH (от 7,5 до 9,0). Использование модифицированных форм Taq-полимеразы позволяет повысить точность и выход амплификации.