ALFA Tag

ALFA Tag — это эпитопный тег, состоящий из 16 аминокислотной последовательности (SRLEEELRRRLTELEN), разработанный для эффективного иммунохимического детектирования и аффинной очистки рекомбинантных белков. Данный тег демонстрирует высокую специфичность взаимодействия с моноклональными антителами, что обеспечивает чувствительное и надёжное распознавание в таких методах, как иммуноблоттинг, иммунофлуоресценция и иммунопреципитация. ALFA Tag оптимизирован для минимального влияния на структуру и функцию фузированных белков, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных систем. Благодаря компактному размеру и низкой иммуногенности, тег эффективно применяется как в прокариотических, так и в эукариотических экспрессионных системах. Его можно размещать как на N-конце, так и на C-конце целевого белка. ALFA Tag совместим с различными системами очистки, включая магнитные и агарозные носители, функционализированные специфичными лигандами. В отличие от более крупных тегов, таких как GST или MBP, ALFA Tag слабо влияет на биофизические свойства рекомбинантного белка. Тег устойчив к денатурирующим условиям и сохраняет иммунореактивность в присутствии детергентов и восстановителей. Разработка ALFA Tag основана на принципах инженерии белковых взаимодействий, направленной на повышение аффинности и специфичности. Использование ALFA Tag позволяет проводить двойные и множественные мечения в рамках одного эксперимента при комбинировании с другими тегами. Тег не содержит цистеиновых остатков, что снижает вероятность образования нежелательных дисульфидных связей. Благодаря высокой стабильности и воспроизводимости, ALFA Tag применяется в исследованиях экспрессии белков, их локализации и взаимодействий. Эпитоп не пересекается с естественными последовательностями модельных организмов, что минимизирует фоновый сигнал. ALFA Tag адаптирован для использования в высокопроизводительных скрининговых системах. Разработка тега выполнена с учётом требований к стандартам структурированных меток в современной молекулярной биологии.