Avi-tag

Avi-tag — это короткий пептидный эпитоп, состоящий из 15 аминокислотных остатков (GLNDIFEAQKIEWHE), который служит субстратом для фермента биотин-лигазы (BirA) из Escherichia coli. В присутствии BirA и биотина Avi-tag автоматически биотинилируется с высокой степенью специфичности и эффективности. Биотинилированный Avi-tag взаимодействует с высокой аффинностью с авидином, стрептавидином или нейтравидином, что делает его полезным инструментом для детекции, очистки и иммобилизации рекомбинантных белков. Модификация происходит в определённом лизиновом остатке пептида, обеспечивая сайт-специфичную биотинилированную метку. Данная система широко применяется в исследованиях белок-белковых взаимодействий, иммуноанализах, визуализации и биосенсорике. В отличие от химического биотинилирования, использование Avi-tag позволяет получить гомогенно модифицированный продукт. Биотинилирование может осуществляться как in vivo, так и in vitro. Размер метки позволяет легко интегрировать её в рекомбинантные белки без значительного влияния на их фолдинг и функцию. Метка может быть размещена на N- или C-конце белка, а также в петлевых регионах поверхностных структур. Система Avi-tag/BirA обеспечивает высокую воспроизводимость и надёжность маркировки белков.