Bromodeoxyuridine (BrdU) - 5-бромо-2'-дезоксиуридин

Bromodeoxyuridine (BrdU) — аналог тимидина, включающийся в состав ДНК в период S-фазы клеточного цикла. Включение BrdU происходит вместо тимидина в процессе репликации ДНК пролиферирующих клеток. В биологических исследованиях BrdU широко используется для оценки клеточной пролиферации in vitro и in vivo. Молекула BrdU представляет собой синтетическое нуклеозидное производное, состоящее из дезоксирибозы и броминированного урацила. После встраивания в ДНК, BrdU детектируется с помощью специфических моноклональных антител, направленных против бромдезоксиуридина. Детекция BrdU позволяет количественно и качественно оценивать скорость деления клеток в тканях и культурах. Метод идентификации пролиферирующих клеток с использованием BrdU является альтернативой другим подходам, таким как анализ экспрессии Ki-67 или измерение активности ДНК-полимеразы. Применение BrdU не ограничено конкретным типом клеток и может использоваться в исследованиях нейрогенеза, иммунологии, онкологии и регенеративной медицины. Включение BrdU в ДНК не нарушает её структуру, однако может оказывать слабое цитотоксическое действие при высоких концентрациях. Молекула сохраняется в клетке на протяжении нескольких делений, что позволяет отслеживать клеточные линии. BrdU не метаболизируется в клетке и не включается в РНК. Его локализация строго ограничена ядром в составе геномной ДНК. Метод с использованием BrdU требует денатурации ДНК для обеспечения доступа антител к антигену. Это достигается обработкой кислотой или ферментами. BrdU является стандартным маркером пролиферации, применяемым в гистохимии, иммуноцитохимии и проточной цитометрии. Данный подход позволяет исследовать динамику клеточного цикла и оценивать пролиферативную активность в патологических и физиологических условиях.