Red fluorescent protein (RFP)

Red fluorescent protein (RFP) — это люминесцентный белок, впервые выделенный из коралла Discosoma sp., способный излучать красный свет при возбуждении светом соответствующей длины волны. Белок относится к семейству флуоресцентных белков, широко используемых в качестве репортеров в молекулярной и клеточной биологии. RFP состоит из 236 аминокислот и формирует характерную бета-баррельную структуру, внутри которой располагается хромофор, образующийся автокаталитически из трёх аминокислот — Glu215, Thr216 и Gly217. Флуоресценция RFP проявляется в диапазоне длин волн 580–610 нм, что делает его полезным для визуализации в многоцветных экспериментах совместно с другими флуоресцентными белками, например GFP. Благодаря устойчивости к вариациям pH и температуры, RFP эффективно применяется в долгосрочных живых клеточных наблюдениях. Модифицированные формы RFP, такие как mCherry, mStrawberry и tdTomato, обладают улучшенными характеристиками, включая повышенную яркость и фотостабильность. RFP широко используется для маркировки белков, отслеживания экспрессии генов, анализа субклеточной локализации и построения трансгенных моделей. В отличие от GFP, RFP имеет более длинноволновое излучение, что снижает фоновый шум в тканях с высоким содержанием автофлуоресценции. Белок не требует добавления внешних субстратов для проявления флуоресценции, что обеспечивает его автономность в клеточных системах. Экспрессия RFP может быть контролируемой или конститутивной в зависимости от типа вектора экспрессии. RFP совместим с различными методами визуализации, включая конфокальную и широкопольную флуоресцентную микроскопию. В биотехнологии RFP служит инструментом для отбора трансфицированных клеток. Благодаря своей надёжности и универсальности, RFP остаётся ключевым инструментом в современных биомедицинских исследованиях. Структурные особенности RFP позволяют проводить его дальнейшую инженерию для получения новых вариантов с заданными оптическими свойствами.