Методика FCM

Проточная цитометрия: мощный инструмент многопараметрического анализа клеток

Проточная цитометрия — это высокоточный аналитический метод, позволяющий количественно оценивать физико-химические характеристики отдельных клеток или частиц в потоке. Метод широко используется в иммунологии, онкогематологии, клеточной биологии и биомедицинских исследованиях благодаря своей скорости, чувствительности и способности одновременно анализировать несколько параметров на уровне одной клетки.

В отличие от стандартных коммерческих панелей, использование отобранных антител и реагентов в проточной цитометрии открывает исследователю широкие возможности для настройки панели под конкретную задачу — от базовой фенотипизации до сложного функционального анализа.

Принцип метода

Клетки метятся флуоресцентно-конъюгированными антителами, специфичными к интересующим молекулам на поверхности или внутри клетки. По мере прохождения клеток через узкий поток в лазерном луче, происходит возбуждение флуорофоров, и флуоресцентный сигнал регистрируется детекторами. Одновременно анализируются и рассеяния света — показатели размера и гранулярности клетки.

Основные этапы работы:

• Выбор и комбинация флуоресцентно меченых антител;

• Окраска клеток и (при необходимости) внутриклеточная пермеабилизация;

• Настройка компенсации перекрывающихся спектров;

• Анализ данных в специализированном ПО (FlowJo, FCS Express и др.).

Преимущества индивидуального подхода

• Гибкость панелей: вы выбираете нужные маркеры, флуорофоры и форматы антител;

• Адаптация под модель: оптимизация панели под конкретный вид (человек, мышь и др.) или редкие популяции;

• Контроль качества: выбор уровня чистоты и типа антител (моноклональные, рекомбинантные, изотипические контроли).

Области применения

Индивидуально собранные панели антител для проточной цитометрии позволяют решать широкий круг задач:

• Иммунологические исследования — фенотипизация Т-, B-, NK-клеток, анализ активации и экспрессии цитокинов;

• Исследование стволовых клеток и редких популяций;

• Апоптоз и жизнеспособность клеток;

• Функциональный анализ — пролиферация, фагоцитоз, продукция внутриклеточных молекул;

• Клиническая валидация и биомониторинг.

Решения от нашей компании

Мы предлагаем всё необходимое для проточной цитометрии:

• Флуоресцентно-конъюгированные антитела — широкий выбор маркеров и флуорофоров;

• Антитела в формате unconjugated — с возможностью мечения под нужную панель;

• Изотипические контроли, красители, пермеабилизирующие буферы и блокирующие реагенты;

• Консультации по дизайну панелей, выбору флуорофоров и оптимизации окраски.

Проточная цитометрия с использованием отдельных антител — это идеальный выбор для исследователей, которым важны точность, масштабируемость и контроль над каждой стадией анализа. Свяжитесь с нами — мы поможем создать эффективную и надёжную панель именно для вашей задачи.