Active Advanced Glycation End Product (AGE) (APB353Ge01)

Глюкоза и другие восстанавливающие сахара способны неферментативно реагировать с аминогруппами белков, образуя соединения, называемые конечными продуктами гликирования (AGE). AGE реализуют свои клеточные функции посредством взаимодействия с рецептором конечных продуктов гликирования (RAGE). Сообщалось, что AGE стимулируют дифференцировку и пролиферацию клеток линии 3T3, в связи с чем был проведен анализ пролиферации с использованием данных клеток. Кратко: клетки 3T3 высевали в трех повторностях в лунки 96-луночных планшетов из расчета 2000 клеток на лунку и оставляли для адгезии на ночь, после чего среду заменяли на стандартную бессывороточную среду DMEM перед добавлением AGE в различных концентрациях. После инкубации в течение 48 часов клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Для этого в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37°C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты наблюдения за пролиферацией клеток 3T3 после 48-часовой инкубации с AGE с помощью инвертированного микроскопа представлены на рисунке 1. Жизнеспособность клеток оценивали методом CCK-8 после 48-часовой инкубации с рекомбинантным AGE; результаты представлены на рисунке 2. Было очевидно, что AGE достоверно повышали жизнеспособность клеток 3T3.