Active Apolipoprotein C3 (APOC3) (APB890Mu01)

Проводили анализ связывания методом ИФА для детекции взаимодействия рекомбинантного мышиного аполипопротеина C3 (APOC3) и рекомбинантной мышиной пренилцистеин-оксидазы 1 (PCYOX1). APOC3 серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). Образцы объемом 100 мкл в двух повторностях вносили в лунки планшета, покрытые PCYOX1, и инкубировали в течение 2 ч при 37°C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали с поликлональными антителами к APOC3 в течение 1 ч, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее вносили вторичные антитела, меченные пероксидазой хрена (HRP), после чего снова удаляли раствор и трехкратно промывали лунки. Добавляли субстратный раствор и инкубировали 15–25 мин при 37°C. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-раствора и немедленно измеряли оптическую плотность при 450 нм. Результаты, представленные на рисунке 1, демонстрируют дозозависимое связывание APOC3 с PCYOX1.