Active Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) (APA014Bo01)

Белок BMP4 (костный морфогенетический белок 4), являющийся членом семейства костных морфогенетических белков и участвующий в развитии костной и хрящевой тканей, формировании зубов и конечностей, а также репарации переломов, был протестирован на способность индуцировать апоптоз клеток. Клетки HepG2 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты по 4000 клеток в лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии, после чего среду заменяли на стандартную среду DMEM с 5% сыворотки, содержащую рекомбинантный бычий BMP4 в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. На рисунке 1 представлены результаты наблюдения апоптоза клеток HepG2 после 72-часовой инкубации с BMP4 с помощью инвертированного микроскопа. На рисунке 2 показаны результаты оценки жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным бычьим BMP4. Было установлено, что BMP4 достоверно снижает жизнеспособность клеток HepG2. Значение ED50 для рекомбинантного бычьего BMP4 составило 3,07 мкг/мл.

На рисунке 2 показано ингибирование пролиферации клеток HepG2 после стимуляции рекомбинантным бычьим белком BMP4.