Active Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) (APA014Ga01)

Белок BMP4 (костный морфогенетический белок 4), являющийся членом семейства костных морфогенетических белков и участвующий в развитии костной и хрящевой тканей, формировании зубов и конечностей, а также репарации переломов, был протестирован на способность индуцировать апоптоз клеток. Клетки HepG2 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты по 4000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии, после чего среду заменяли на среду DMEM со стандартным содержанием 5% сыворотки, содержащую рекомбинантный BMP4 курицы в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. На рисунке 1 представлены результаты наблюдения за апоптозом клеток HepG2 после 72-часовой инкубации с BMP4 с помощью инвертированного микроскопа. На рисунке 2 показаны результаты оценки жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным BMP4 курицы. Было установлено, что BMP4 достоверно снижает жизнеспособность клеток HepG2. Значение ED50 для рекомбинантного BMP4 курицы составило 4,86 мкг/мл.

Рисунок 2. Ингибирование пролиферации клеток HepG2 после стимуляции рекомбинантным белком BMP4 курицы.