Active Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial (CA5B) (APD072Hu01)

Карбоангидраза (КА) катализирует обратимую реакцию CO2 + H2O ⇄ HCO3- + H+, которая лежит в основе многих процессов, таких как дыхание, подкисление почечных канальцев и резорбция костной ткани. Карбоангидраза VB, кодируемая геном CA5B, является митохондриальным белком; по сравнению с другой митохондриальной КА (CA5A), CA5B отличается тканевой локализацией и хромосомной локализацией. Активность рекомбинантной человеческой CA5B оценивали по способности гидролизовать 4-нитрофенилацетат (4-NPA) до 4-нитрофенола. Реакцию проводили в буфере для анализа (12,5 мМ Tris, 75 мМ NaCl, pH 7,5), инициируя добавлением 50 мкл различных концентраций CA5B (разведенных в буфере для анализа) к 50 мкл 2 мМ субстрата 4-NPA (исходный раствор 100 мМ в ацетоне, разведенный в буфере для анализа). Инкубацию проводили при 37°C в течение 5 мин, после чего измеряли оптическую плотность при длине волны 400 нм.