Active Carboxylesterase 1 (CES1) (APC374Hu61)

Карбоксилэстераза 1 (CES1), также известная как печеночная карбоксилэстераза 1, представляет собой сериновую эстеразу из большого семейства многогеновых карбоксилэстераз. Данный белок участвует в детоксикации ксенобиотиков и активации эфирных и амидных пролекарств. Он гидролизует ароматические и алифатические сложные эфиры, но не проявляет каталитической активности в отношении амидов или сложных эфиров жирных ацил-КоА. В частности, CES1 гидролизует метиловую эфирную группу кокаина с образованием бензоилэкгонина. Активность рекомбинантной человеческой CES1 оценивали по способности гидролизовать 4-нитрофенилацетат (4-NPA) до 4-нитрофенола. Реакцию проводили в 50 мМ трис-буфере (pH 7,5); реакцию инициировали добавлением 50 мкл растворов CES1 различной концентрации (разведенных assay-буфером) к 50 мкл 2 мМ субстрата 4-NPA (исходный раствор 100 мМ в ацетоне, разведенный деионизированной водой). Инкубацию проводили при 37°C в течение 10 мин, после чего измеряли оптическую плотность при длине волны 400 нм.