Active Carcinoembryonic Antigen (CEA) (APA150Hu04)

Проводили анализ связывания методом ИФА для оценки взаимодействия рекомбинантного человеческого карциноэмбрионального антигена (CEA) и рекомбинантного человеческого молекулы адгезии клеток, связанной с карциноэмбриональным антигеном 6 (CEACAM6). CEA серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). По 100 мкл каждого образца в двух повторностях вносили в лунки планшета, покрытые CEACAM6, и инкубировали в течение 2 ч при 37°C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к CEA, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее вносили вторичные антитела, меченные пероксидазой хрена (HRP), после чего снова удаляли раствор и трехкратно промывали лунки. Добавляли субстратный раствор и инкубировали 15–25 мин при 37°C. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-раствора и немедленно измеряли оптическую плотность при 450 нм. Результаты, представленные на рисунке 1, демонстрируют дозозависимое связывание между CEA и CEACAM6.