Active Complement Component 1, Q Subcomponent A (C1qA) (APD207Hu01)

Проведен анализ связывания методом ИФА для оценки взаимодействия рекомбинантного человеческого белка C1qA (субкомпонент A компонента комплемента 1q, состоящий из шести А-цепей) и рекомбинантного человеческого С-реактивного белка (CRP). Серийные разведения C1qA в фосфатно-солевом буфере (PBS) с 0,01% БСА (pH 7,4) вносили в лунки планшета, покрытые CRP, и инкубировали в течение 2 ч при 37°C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали с поликлональными антителами к C1qA в течение 1 ч, затем промывали три раза. Далее проводили инкубацию с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), с последующей трехкратной промывкой. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали 15–25 мин при 37°C, реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-раствора и немедленно измеряли оптическую плотность при 450 нм. Результаты (рис. 1) продемонстрировали дозозависимое связывание C1qA с CRP.