Active Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) (APE869Hu01)

Компонент комплемента 1q (C1q) состоит из 18 полипептидных цепей: шести A-цепей, шести B-цепей и шести C-цепей; субкомпонент C1qC образован шестью C-цепями. C1q - белковый комплекс системы комплемента (врожденный иммунитет), который вместе с C1r и C1s формирует комплекс C1 и обладает способностью к мультивалентному связыванию с участками фиксации комплемента на иммуноглобулинах (домен CH2 IgG и, предположительно, домен CH4 IgM; IgG4 не связывает C1q). Поскольку аполипопротеин A1 (APOA1) идентифицирован как партнер взаимодействия C1qC, для детекции связывания рекомбинантного человеческого C1qC с рекомбинантным человеческим APOA1 был проведен иммуноферментный анализ (ИФА). Кратко: C1qC серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с 0,01% БСА (pH 7,4). Дубликаты проб объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые APOA1, и инкубировали 2 ч при 37°C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали 1 ч с поликлональными антителами к C1qC, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. После инкубации с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), раствор удаляли и выполняли трехкратную промывку. При добавлении субстратного раствора лунки инкубировали 15–25 мин при 37°C. В завершение в лунки добавляли 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при 450 нм. Результаты, представленные на рисунке 1, демонстрируют дозозависимую активность связывания C1qC с APOA1.