Active Complement Factor B (CFB) (APC011Hu03)

Фактор комплемента B (CFB), являющийся компонентом альтернативного пути активации комплемента, при активации расщепляется фактором D с образованием некаталитической цепи Ba и каталитической субъединицы Bb; активная субъединица Bb представляет собой сериновую протеазу, которая ассоциирует с C3b, формируя C3-конвертазу альтернативного пути. Функциональную активность рекомбинантного человеческого CFB оценивали в тестах на гемолиз: рекомбинантный человеческий CFB двукратно разводили в растворе, содержащем 0,9% NaCl и 2 ммоль/л MgCl2, после чего добавляли равный объем 1% взвеси эритроцитов кролика (RaE) в 8 ммоль/л ЭДТА; в качестве отрицательного контроля использовали образец без MgCl2. Все образцы инкубировали при 37°C в течение 3 часов, затем отбирали 10 мкл супернатанта, смешивали с 90 мкл TMB и инкубировали при 37°C в течение 5–10 минут. После добавления 50 мкл стоп-раствора немедленно проводили измерение оптической плотности при 450 нм. Результаты представлены на рисунке 1: минимальная эффективная концентрация CFB составила 0,3125 мкг/мл. (A) 1% эритроциты кролика (RaE), обработанные 0,3125 мкг/мл CFB в течение 1 ч; (B) отрицательный контроль (1% RaE, обработанные 0,3125 мкг/мл CFB в присутствии 8 ммоль/л ЭДТА) без MgCl2. Эффект гемолиза, индуцированного рекомбинантным человеческим CFB.

На рисунке представлена гемолитическая активность рекомбинантного человеческого фактора комплемента B (CFB).