Active Endostatin (ES) (APA542Hu61)

Эндостатин (ES) представляет собой природный С-концевой фрагмент коллагена типа XVIII с молекулярной массой 20 кДа, обладающий антиангиогенной активностью, аналогичной ангиостатину и тромбоспондину. Являясь ингибитором ангиогенеза широкого спектра действия, эндостатин может блокировать проангиогенное действие факторов роста, таких как основной фактор роста фибробластов (bFGF/FGF-2) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). Для оценки влияния ES на VEGF-зависимую пролиферацию клеточной линии эндотелия ECV304 клетки высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 5000 клеток на лунку; после адгезии клеток среду заменяли на стандартную DMEM без сыворотки и инкубировали в течение ночи. Затем среду заменяли на стандартную DMEM с содержанием 2% сыворотки, содержащую 10 нг/мл VEGFA и различные концентрации ES. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли по 10 мкл раствора CCK-8, после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37°C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты представлены на рисунке 1. Было установлено, что ES в концентрации 100 нг/мл достоверно ингибирует пролиферацию клеток ECV304.