Active Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10) (APB882Hu01)

Фактор роста фибробластов 10 (FGF10) относится к семейству факторов роста фибробластов (FGF), представители которого обладают широкой митогенной активностью и способствуют выживанию клеток, участвуя в различных биологических процессах, включая эмбриональное развитие, рост клеток, морфогенез, репарацию тканей, рост и инвазию опухолей. Поскольку рецептор фактора роста фибробластов 2 (FGFR2) идентифицирован как партнер взаимодействия FGF10, был проведен связывающий иммуноферментный анализ (ИФА) для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого FGF10 и рекомбинантного человеческого FGFR2. Кратко: FGF10 серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). Дубликатные пробы объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые FGFR2, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к FGF10, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее проводили инкубацию с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), после чего раствор удаляли и выполняли трехкратную промывку. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали в течение 15–25 мин при 37 °C. В завершение в лунки добавляли по 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при 450 нм. Активность связывания FGF10 с FGFR2 представлена на рис. 1; данный эффект носил дозозависимый характер.