Active Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11) (APC913Hu01)

Фактор роста фибробластов 11 (FGF11) относится к семейству факторов роста фибробластов (FGF), представители которого обладают широким спектром митогенной активности и способствуют выживанию клеток, участвуя в различных биологических процессах, включая эмбриональное развитие, рост клеток, морфогенез, репарацию тканей, рост и инвазию опухолей. Функция данного гена пока не установлена. Поскольку рецептор фактора роста фибробластов 1 (FGFR1) идентифицирован как партнер взаимодействия FGF11, был проведен связывающий иммуноферментный анализ (ИФА) для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого FGF11 и рекомбинантного человеческого FGFR1. Кратко: FGF11 серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). Дубликатные пробы объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые FGFR1, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. Лунки промывали буфером PBST и инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к FGF11, после чего раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Затем лунки инкубировали с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), после чего снова удаляли раствор и трехкратно промывали. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали в течение 15–25 мин при 37 °C. В завершение в лунки добавляли по 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при длине волны 450 нм. Активность связывания FGF11 и FGFR1 представлена на рис. 1; данный эффект носил дозозависимый характер.