Active Fibroblast Growth Factor 18 (FGF18) (APC907Hu01)

Фактор роста фибробластов 18 (FGF18) является трофическим фактором для зрелых хондроцитов и их предшественников, оказывая выраженное анаболическое действие на хрящевую ткань и играя ключевую роль в росте и развитии скелета. Поскольку рецептор фактора роста фибробластов 3 (FGFR3) идентифицирован как партнер взаимодействия FGF18, был проведен иммуноферментный анализ (ИФА) связывания для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого FGF18 и рекомбинантного человеческого FGFR3. Кратко: FGF18 серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). Дубликаты проб объемом 100 мкл вносили в лунки микропланшета, покрытые FGFR3, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к FGF18, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее проводили инкубацию с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), после чего раствор удаляли и выполняли трехкратную промывку. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали в течение 15–25 мин при 37 °C. В завершение в лунки добавляли по 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при 450 нм. Активность связывания FGF18 с FGFR3 представлена на рис. 1; данный эффект носил дозозависимый характер.