Active Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) (APA032Hu01)

FGF1 (фактор роста фибробластов 1) представляет собой члена семейства FGF, играющего важную роль в регуляции выживаемости, деления, ангиогенеза, дифференцировки и миграции клеток. Поскольку FGF1 стимулирует пролиферацию фибробластов 3T3, а аминокислотные последовательности человеческого и мышиного FGF1 имеют 96% идентичности, для оценки биологической активности рекомбинантного человеческого FGF1 был проведен тест пролиферации клеток с использованием фибробластов 3T3. Кратко: клетки 3T3 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 2000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем среду заменяли на стандартную DMEM без сыворотки перед добавлением FGF1 в различных концентрациях. После 48 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Для этого в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37°C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты наблюдения за пролиферацией клеток 3T3 после 48-часовой инкубации с FGF1 представлены на рисунке 1. Оценка жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 48-часовой инкубации с рекомбинантным FGF1 показана на рисунке 2. Было установлено, что FGF1 достоверно повышает жизнеспособность клеток 3T3.

Рис. Вестерн-блоттинг; образец: рекомбинантный FGF1 человека.