Active Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3) (APC906Hu01)

Фактор роста фибробластов 3 (FGF3), также известный как белок протоонкогена INT-2, относится к семейству факторов роста фибробластов, представители которого обладают широкой митогенной активностью и способствуют выживанию клеток, участвуя в эмбриональном развитии, росте клеток, морфогенезе, репарации тканей, а также росте и инвазии опухолей. Поскольку рецептор фактора роста фибробластов 2 (FGFR2) идентифицирован как партнер взаимодействия FGF3, был проведен связывающий иммуноферментный анализ (ИФА) для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого FGF3 и рекомбинантного человеческого FGFR2. Кратко: FGF3 серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% бычьего сывороточного альбумина (БСА, pH 7,4). Дубликатные пробы объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые FGFR2, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к FGFR2, затем раствор удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее проводили инкубацию с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена (HRP), после чего раствор удаляли и выполняли трехкратную промывку. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали в течение 15–25 мин при 37 °C. В завершение в лунки добавляли по 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при длине волны 450 нм. Активность связывания FGF3 с FGFR2 представлена на рисунке 1; данный эффект носил дозозависимый характер. Активность связывания FGF3 с FGFR2.