Active Gremlin 1 (GREM1) (APC128Hu02)

Гремин-1 (GREM1) является ингибитором сигнального пути TGF-бета; антагонисты BMP, включая GREM1, играют важную роль в выживании и пролиферации стромы опухоли при различных злокачественных новообразованиях. Экспрессия данного белка обнаруживается при раке шейки матки, легких, яичников, почек, молочной железы, толстой кишки, поджелудочной железы и саркомах. Для оценки биологической активности рекомбинантного человеческого GREM1 проведен анализ пролиферации на клеточной линии A549. Клетки A549 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты по 5000 клеток на лунку, давали им прикрепиться, после чего среду заменяли на бессывороточную на ночь, а затем - на стандартную среду DMEM с 2% сыворотки перед добавлением GREM1 в различных концентрациях. После 96 ч инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Для этого в каждую лунку добавляли по 10 мкл раствора CCK-8, инкубировали планшет при 37°C в течение 1–4 ч и измеряли оптическую плотность при 450 нм на микропланшетном ридере. На рис. 1 представлены результаты микроскопии клеток A549 после 96 ч инкубации с GREM1. Жизнеспособность клеток оценивали методом CCK-8 после 96 ч инкубации с рекомбинантным GREM1 (рис. 2). Установлено, что GREM1 достоверно повышает жизнеспособность клеток A549. (A) Клетки A549, культивированные в среде DMEM и стимулированные GREM1 в концентрации 1 нг/мл в течение 96 ч; (B) Контрольные нестимулированные клетки A549, культивированные в среде DMEM в течение 96 ч.

На рисунке представлена пролиферация клеток линии A549 после стимуляции белком GREM1.