Active Interferon Alpha (IFNa) (APA033Po01)

Интерферон-альфа (IFN-α), также известный как лейкоцитарный интерферон, представляет собой группу родственных, но различных белков с гомологией аминокислотной последовательности более 95%. Они относятся к семейству интерферонов I типа и связываются с общим клеточным поверхностным рецептором, состоящим из двух субъединиц. IFN-α обладает противовирусной и иммуномодулирующей активностью в отношении клеток-мишеней. Для оценки влияния IFN-α на апоптоз клетки A549 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 4000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии, после чего среду заменяли на среду DMEM со стандартным содержанием 5% сыворотки, содержащую рекомбинантный свиной IFN-α в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. На Рисунке 1 представлены результаты наблюдения за апоптозом клеток A549 после 72-часовой инкубации с IFN-α с помощью инвертированного микроскопа. На Рисунке 2 показаны результаты оценки жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным IFN-α. Было установлено, что IFN-α достоверно снижает жизнеспособность клеток A549. Значение ED50 для рекомбинантного свиного IFN-α составило 9,24 мкг/мл.

На рисунке 2 показано ингибирование пролиферации клеток A549 после стимуляции рекомбинантным свиным интерфероном-альфа (IFN-α).