Active Interferon Beta (IFNb) (APA222Ca02)

Интерферон бета (IFNβ), относящийся к семейству интерферонов I типа, продуцируется фибробластами и обладает противовирусной активностью, преимущественно в рамках врожденного иммунного ответа. Для оценки влияния IFNβ на апоптоз клетки линии A549 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты плотностью 4000 клеток/лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем среду заменяли на среду DMEM с добавлением 5% сыворотки, содержащую рекомбинантный IFNβ собаки в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, после чего через 1–4 часа инкубации при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. На Рисунке 1 представлены результаты микроскопического наблюдения апоптоза клеток A549 после 72-часовой инкубации с IFNβ. На Рисунке 2 показаны данные оценки жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным IFNβ собаки. Было установлено, что IFNβ достоверно снижает жизнеспособность клеток A549. Значение EC50 для рекомбинантного IFNβ собаки составило около 3 мкг/мл.

Рисунок 2. Апоптоз клеток A549 после стимуляции рекомбинантным собачьим интерфероном бета (IFN-β).