Active Interferon Beta (IFNb) (APA222Ca61)

Интерферон бета (IFNb) относится к семейству интерферонов I типа, крупной подгруппы белков, регулирующих активность иммунной системы; белки IFNb продуцируются фибробластами в больших количествах и обладают противовирусной активностью, преимущественно в рамках врожденного иммунного ответа. Описаны два типа IFNb: IFNb1 (IFNB1) и IFNb3 (IFNB3), причем IFNb1 применяется для лечения рассеянного склероза, снижая частоту рецидивов. Для оценки влияния IFNb на апоптоз клеток A549 их высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 4000 клеток на лунку, давали прикрепиться, инкубировали ночь в среде без сыворотки, после чего среду заменяли на стандартную DMEM с 5% сыворотки перед добавлением рекомбинантного IFNb собаки в различных концентрациях. После 48 ч инкубации клетки исследовали под инвертированным микроскопом, а пролиферацию оценивали с помощью набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8): в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, инкубировали планшет 1–4 ч при 37 °C и измеряли оптическую плотность при 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты микроскопии апоптоза клеток A549 после 48 ч инкубации с IFNb представлены на рис. 1, а данные оценки жизнеспособности методом CCK-8 после 48 ч инкубации с рекомбинантным IFNb - на рис. 2. Установлено, что IFNb достоверно снижает жизнеспособность клеток A549; значение EC50 для рекомбинантного IFNb собаки составило 1,65 мкг/мл.

На рисунке 2 представлен апоптоз клеток A549 после стимуляции интерфероном бета (IFNb).