Active Interferon Beta (IFNb) (APA222Eq01)

Интерферон бета (IFNβ), относящийся к семейству интерферонов I типа, продуцируется фибробластами и обладает противовирусной активностью, преимущественно в рамках врожденного иммунного ответа; описаны два типа: IFNβ1 (IFNB1) и IFNβ3 (IFNB3), причем IFNβ1 применяется для лечения рассеянного склероза. Для оценки влияния IFNβ на апоптоз клетки A549 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты по 4000 клеток/лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии, после чего среду заменяли на среду DMEM с 5% сыворотки, содержащую рекомбинантный лошадиный IFNβ в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8): в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм. На рис. 1 представлены результаты микроскопического наблюдения апоптоза клеток A549 после 72-часовой инкубации с IFNβ. На рис. 2 показаны данные оценки жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным IFNβ; установлено, что IFNβ достоверно снижает жизнеспособность клеток A549. Значение ED50 для рекомбинантного лошадиного IFNβ составило 3,95 мкг/мл.

На рисунке 2 представлен апоптоз клеток A549 после стимуляции рекомбинантным интерфероном бета (IFNb) лошади.