Active Interferon Beta (IFNb) (APA222Po02)

Интерферон бета (IFNβ), относящийся к семейству интерферонов I типа и продуцируемый преимущественно фибробластами, обладает противовирусной активностью и участвует в реализации врожденного иммунного ответа; описаны две его формы: IFNβ1 (применяемый для лечения рассеянного склероза) и IFNβ3. Для оценки влияния IFNβ на апоптоз клетки линии A549 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 5000 клеток на лунку, инкубировали до адгезии, затем среду заменяли на бессывороточную на ночь, после чего добавляли стандартную среду DMEM с 5% сыворотки и различные концентрации рекомбинантного IFNβ свиньи. После 48 часов инкубации морфологию клеток оценивали с помощью инвертированного микроскопа (рис. 1), а пролиферацию определяли методом CCK-8 (Cell Counting Kit-8): в каждую лунку вносили по 10 мкл раствора CCK-8, инкубировали планшет при 37 °C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере (рис. 2). Результаты показали, что IFNβ достоверно снижает жизнеспособность клеток A549; значение ED50 для рекомбинантного IFNβ свиньи составило 4,9 мкг/мл.

На рисунке 2 представлен апоптоз клеток A549 после стимуляции интерфероном бета (IFNb).