Active Interleukin 17 Receptor B (IL17RB) (APD351Hu01)

IL17RB (рецептор интерлейкина-17B) является рецептором для провоспалительных цитокинов IL17B и IL17E. Показано, что данный рецептор опосредует активацию NF-κB и индукцию синтеза IL8 под действием IL17E. Для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого IL17RB с рекомбинантным человеческим IL17B был разработан ИФА связывания. Кратко: раствор IL17RB серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS), содержащем 0,01% БСА (pH 7,4). Дубликатные пробы объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые IL17B, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к IL17RB, затем содержимое удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее вносили вторичные антитела, меченные пероксидазой хрена (HRP), после чего снова удаляли раствор и трехкратно промывали лунки. Добавляли субстратный раствор и инкубировали 15–25 мин при 37 °C. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-раствора в каждую лунку и немедленно измеряли оптическую плотность при 450 нм. Активность связывания IL17RB с IL17B представлена на рисунке 1; наблюдалась дозозависимая реакция.