Active Interleukin 17C (IL17C) (APD347Hu01)

Интерлейкин-17C (IL17C) представляет собой цитокин, продуцируемый Т-клетками, который обладает гомологией последовательности с IL17 и, как предполагается, играет ключевую роль в врожденном иммунитете эпителия. IL17C связывается с высоким сродством с рецептором IL17RA. Для детекции взаимодействия рекомбинантного человеческого IL17C (rhIL17C) с IL17RA был разработан связывающий иммуноферментный анализ (ИФА). Кратко: rhIL17C последовательно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS), содержащем 0,1% бычьего сывороточного альбумина (БСА), pH 7,4. Дубликатные пробы объемом 100 мкл вносили в лунки планшета, покрытые IL17RA, и инкубировали в течение 2 ч при 37 °C. После промывки буфером PBST лунки инкубировали в течение 1 ч с поликлональными антителами к IL17, затем содержимое удаляли и проводили трехкратную промывку. Далее следовала инкубация с вторичными антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена (HRP), после чего снова выполняли удаление содержимого и трехкратную промывку. После внесения субстратного раствора лунки инкубировали в течение 15–25 мин при 37 °C. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл стоп-раствора в каждую лунку и немедленно измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм. Активность связывания IL17C с IL17RA представлена на рисунке 1; данный эффект носил дозозависимый характер.