Active Interleukin 2 (IL2) (APA073Gu01)

Интерлейкин-2 (ИЛ-2) представляет собой цитокин, продуцируемый Т-клетками в ответ на антигенную или митогенную стимуляцию и необходимый для пролиферации Т- и В-клеток. Для оценки биоактивности рекомбинантного ИЛ-2 морской свинки готовили суспензию спленоцитов, которую активировали конканавалином А (конечная концентрация 3 мкг/мл). Через 72 ч клетки собирали и промывали раствором Хэнкса. Лимфоциты селезенки мыши высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты в концентрации 10 000 клеток/лунку в присутствии или отсутствии различных концентраций рекомбинантного ИЛ-2 морской свинки. После 96 ч инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора CCK-8. В каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37 °C в течение 1–4 ч и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты микроскопии пролиферации спленоцитов после 96 ч инкубации с ИЛ-2 представлены на рис. 1, кривая «доза–эффект» для рекомбинантного ИЛ-2 морской свинки - на рис. 2. Установлено, что рекомбинантный ИЛ-2 морской свинки достоверно стимулирует пролиферацию спленоцитов. Значение EC50 для данного эффекта составляет 0,195–0,323 мкг/мл.

На рисунке 2 представлена кривая дозозависимого эффекта интерлейкина-2 (ИЛ-2) на спленоцитах.