Active Interleukin 4 (IL4) (APA077Bo61)

Интерлейкин-4 (IL4) представляет собой цитокин, индуцирующий дифференцировку наивных T-хелперов (Th0) в Th2-клетки, которые при активации IL4 дополнительно продуцируют этот цитокин по механизму положительной обратной связи. IL4 выполняет множество биологических функций, включая стимуляцию пролиферации активированных B- и T-клеток, а также дифференцировку B-клеток в плазматические клетки; он является ключевым регулятором гуморального и адаптивного иммунитета. IL4 индуцирует переключение классов иммуноглобулинов B-клеток на IgE и повышает экспрессию молекул MHC класса II, одновременно подавляя образование Th1-клеток, макрофагов, интерферона-гамма и IL12 дендритными клетками. Активность IL4 оценивали в тесте пролиферации клеток TF-1. Клетки TF-1 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты в концентрации 8000 клеток/лунку в среду RPMI 1640 с 2% сыворотки, содержащую рекомбинантный бычий IL4 в различных концентрациях. После 4 дней инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 2–4 ч при 37 °C измеряли оптическую плотность при 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты наблюдения пролиферации клеток TF-1 после 4 дней инкубации с IL4 с помощью инвертированного микроскопа представлены на рис. 1. Оценка жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 4 дней инкубации с рекомбинантным бычьим IL4 показана на рис. 2. Было установлено, что IL4 достоверно повышает жизнеспособность клеток TF-1. Значение ED50 составило 0,92 нг/мл.

На рисунке 2 показана пролиферация клеток TF-1 после стимуляции интерлейкином-4 (IL-4).