Active Interleukin 6 Receptor (IL6R) (APB815Hu61)

Рецептор интерлейкина-6 (IL-6R), относящийся к семейству цитокиновых рецепторов I типа (подсемейство 3), представляет собой белковый комплекс, состоящий из данной субъединицы и сигнального трансдуктора интерлейкина-6 (IL6ST/GP130/IL6β). Эта рецепторная субъединица также используется многими другими цитокинами. Нарушение продукции IL-6 и его рецептора связано с патогенезом ряда заболеваний, таких как множественная миелома, аутоиммунные патологии и рак предстательной железы. IL-6Rα (IL-6RA) является основной функциональной альфа-субъединицей рецептора IL-6 и компонентом других рецепторов интерлейкинов; это трансмембранный гликопротеин I типа, регулирующий биологическую активность IL-6 за счет образования комплекса с CD130. IL-6R также играет важную роль в реакции острой фазы и гемопоэтическом ответе. Для детекции ассоциации рекомбинантного человеческого IL-6R с рекомбинантным человеческим JAK2 был проведен связывающий иммуноферментный анализ (ИФА). Кратко: биотинилированный IL-6R серийно разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавлением 0,01% БСА (pH 7,4). Дубликаты проб объемом 100 мкл вносили в лунки микропланшета, покрытые JAK2, и инкубировали в течение 1 ч при 37°C. После трехкратной промывки лунок буфером PBST проводили инкубацию со стрептавидин-ХРП в течение 30 мин, затем раствор удаляли и лунки промывали 5 раз. После добавления субстратного раствора лунки инкубировали 15–25 мин при 37°C. В завершение в лунки добавляли по 50 мкл стоп-раствора и немедленно проводили измерение оптической плотности при 450 нм. Активность связывания IL-6R и JAK2 представлена на рисунке 1; значение EC50 для данного эффекта составило 1,182 мкг/мл.