Active Interleukin 8 (IL8) (APA080Bo61)

Интерлейкин-8 (IL8, или хемокин CXCL8) - это хемокин, продуцируемый макрофагами и другими типами клеток, такими как эпителиальные клетки, гладкомышечные клетки дыхательных путей и эндотелиальные клетки. Для оценки хемотаксического эффекта IL8 на линию клеток лейкоза Т-лимфоцитов человека Jurkat был проведен анализ хемотаксиса с использованием 24-луночной микрохемотаксической системы. Кратко: клетки Jurkat вносили в верхние камеры (150 мкл клеточной суспензии, 10⁶ клеток/мл в среде RPMI 1640 без добавления фетальной бычьей сыворотки), а в нижние камеры добавляли рекомбинантный бычий IL8 в различных концентрациях, разведенный в бессывороточной среде RPMI 1640; камеры были разделены поликарбонатным фильтром с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37 °C в атмосфере с 5% CO₂ в течение 60 мин фильтр удаляли, клетки в нижней камере визуализировали с помощью инвертированного микроскопа при малом увеличении (×100), а количество мигрировавших клеток подсчитывали при большом увеличении (×400) случайным образом в пяти полях зрения для каждого фильтра. Результаты показали, что IL8 способен индуцировать миграцию клеток Jurkat. На Рисунке 1 представлены мигрировавшие клетки Jurkat в нижней камере при малом увеличении (×100). Для статистического анализа в каждой камере случайным образом выбирали пять полей зрения и подсчитывали количество мигрировавших клеток при большом увеличении (×400); статистические результаты приведены на Рисунке 2. Оптимальная хемотаксическая активность IL8 наблюдается в диапазоне концентраций 0,01–0,1 нг/мл.

На рисунке 2 показано хемотаксическое действие рекомбинантного бычьего интерлейкина-8 (IL8) на клетки Jurkat.