Active Interleukin 8 (IL8) (APA080Ga01)

Интерлейкин-8 (IL8, или хемокин CXCL8) - это хемокин, продуцируемый макрофагами и другими типами клеток, такими как эпителиальные клетки, клетки гладкой мускулатуры дыхательных путей и эндотелиальные клетки. Для оценки хемотаксического эффекта IL8 на линию клеток лейкоза Т-лимфоцитов человека Jurkat был проведен анализ хемотаксиса с использованием 24-луночной микрохемотаксической системы. Кратко: клетки Jurkat высевали в верхние камеры (100 мкл клеточной суспензии, 10⁶ клеток/мл в среде RPMI 1640 без добавления фетальной бычьей сыворотки), а рекомбинантный куриный IL8 (в концентрациях 1, 10, 100 и 1000 нг/мл, разведенных в среде RPMI 1640 без сыворотки) добавляли в нижние камеры; камеры были разделены поликарбонатным фильтром с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37°C в атмосфере с 5% CO₂ в течение 90 минут фильтр удаляли, затем клетки в нижних камерах наблюдали под инвертированным микроскопом при малом увеличении (×100), а количество мигрировавших клеток подсчитывали при большом увеличении (×400) случайным образом в пяти полях зрения для каждого фильтра. Результаты показали, что IL8 способен индуцировать миграцию клеток Jurkat. На Рисунке 1 представлены мигрировавшие клетки Jurkat в нижних камерах, наблюдаемые при малом увеличении (×100). Для каждого луночного отсека случайным образом выбирали пять полей зрения, и подсчет мигрировавших клеток проводили при большом увеличении (×400). Статистические результаты представлены на Рисунке 2. Оптимальная хемотаксическая активность IL8 наблюдается при концентрации 10 нг/мл.

На рисунке 2 показано хемотаксическое действие рекомбинантного куриного интерлейкина-8 (IL-8) на клетки Jurkat.