Active Interleukin 8 (IL8) (APA080Si01)

Интерлейкин-8 (IL8, или хемокин (C-X-C мотив) лиганд 8, CXCL8) представляет собой хемокин, продуцируемый макрофагами и другими типами клеток, такими как эпителиальные клетки, клетки гладкой мускулатуры дыхательных путей и эндотелиальные клетки. Для оценки хемотаксического эффекта IL8 на линию клеток лейкоза Т-лимфоцитов человека Jurkat был проведен анализ хемотаксиса с использованием 24-луночной микрохемотаксической системы. Кратко: клетки Jurkat высевали в верхние камеры (100 мкл клеточной суспензии, 10⁶ клеток/мл в среде RPMI 1640 без добавления фетальной бычьей сыворотки), а рекомбинантный IL8 обезьяны (1 нг/мл, 10 нг/мл, 100 нг/мл и 1000 нг/мл, разведенные отдельно в среде RPMI 1640 без сыворотки) добавляли в нижние камеры; разделение камер осуществлялось с помощью поликарбонатного фильтра с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37 °C в атмосфере с 5% CO₂ в течение 90 мин фильтр удаляли, затем клетки в нижней камере наблюдали под инвертированным микроскопом при малом увеличении (×100), а количество мигрировавших клеток подсчитывали при большом увеличении (×400) случайным образом (пять полей зрения для каждого фильтра). Результаты показали, что IL8 способен индуцировать миграцию клеток Jurkat. На Рисунке 1 представлены мигрировавшие клетки Jurkat в нижней камере, наблюдаемые при малом увеличении (×100). Для каждого луночного отсека случайным образом выбирали пять полей зрения, и подсчет мигрировавших клеток проводили при большом увеличении (×400). Статистические результаты представлены на Рисунке 2. Оптимальная хемотаксическая активность IL8 наблюдается в диапазоне концентраций 10–100 нг/мл.

На рисунке 2 показан хемотаксический эффект рекомбинантного интерлейкина-8 (IL-8) обезьяны на клетках линии Jurkat.