Active Lemur Tyrosine Kinase 3 (LMTK3) (APE375Hu01)

Тирозинкиназа 3 лемура (LMTK3), относящаяся к семейству рецепторных тирозинкиназ (RTK), играет роль в росте рака молочной железы и развитии резистентности к эндокринной терапии. Сообщалось, что LMTK3 способствует инвазии, подвижности и миграции клеток линии рака молочной железы MCF-7. Для оценки биоактивности LMTK3 клетки MCF-7 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 2000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем среду заменяли на бессывороточную стандартную среду DMEM перед добавлением LMTK3 в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли по 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37°C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Данные о пролиферации клеток MCF-7 после 72-часовой инкубации с LMTK3, полученные при наблюдении в инвертированный микроскоп, представлены на рисунке 1.

На рисунке 2 представлена кривая зависимости «доза-эффект» для белка LMTK3. Было установлено, что LMTK3 достоверно стимулирует пролиферацию клеток линии MCF-7. Значение ED50 для данного эффекта составляет приблизительно 6,14–50 нг/мл.