Active Leukemia Inhibitory Factor (LIF) (APA085Ra01)

Лейкемический ингибирующий фактор (LIF) представляет собой цитокин класса интерлейкина-6, который влияет на рост клеток, подавляя их дифференцировку, а также участвует в регуляции роста и дифференцировки различных типов клеток-мишеней, метаболизме костной ткани, кахексии, нейроразвитии, эмбриогенезе и воспалении. Для оценки активности рекомбинантного LIF крысы клетки K562 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты плотностью 5000 клеток/лунку в стандартную среду RPMI-1640 с 5% сыворотки, содержащую различные концентрации рекомбинантного LIF крысы. После инкубации в течение 72 ч клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора CCK-8 (Cell Counting Kit-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 2–4 ч при 37 °C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Ингибирование пролиферации клеток K562 под действием LIF в течение 72 ч, наблюдаемое с помощью инвертированного микроскопа, представлено на рис. 1. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью теста CCK-8 после 72-часовой инкубации с рекомбинантным LIF; результаты представлены на рис. 2. Было установлено, что LIF достоверно подавляет жизнеспособность клеток K562. Значение ED50 составило 1,44 мкг/мл.

На рисунке 2 показано ингибирование пролиферации клеток K562 после стимуляции фактором ингибирования лейкемии (LIF).