Active Monocyte Chemotactic Protein 4 (MCP4) (APA216Hu51)

CCL13 (хемокин C-C-мотива 13) относится к подсемейству CC-хемокинов и является хемотаксическим фактором, привлекающим моноциты, лимфоциты, базофилы и эозинофилы. Сообщалось, что CCL13 способен индуцировать хемотаксическую миграцию клеток линии THP-1. В связи с этим для оценки хемотаксического эффекта CCL13 на человеческую моноцитарную клеточную линию THP-1 был проведен анализ хемотаксиса с использованием 24-луночной системы микрохемотаксиса. Кратко: суспензию клеток THP-1 (100 мкл, концентрация 10⁶ кл/мл в среде RPMI 1640 с 0,5% ЭБС) вносили в верхние камеры, а CCL13 (разведенный до концентраций 50 нг/мл и 100 нг/мл в бессывороточной среде RPMI 1640) добавляли в нижние камеры. Камеры разделяли поликарбонатным фильтром с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37 °C и 5% CO₂ в течение 3 ч фильтр удаляли. Клетки, мигрировавшие в нижнюю камеру, визуализировали с помощью инвертированного микроскопа при малом увеличении (×100), после чего проводили подсчет мигрировавших клеток при большом увеличении (×400) случайным образом в пяти полях зрения для каждого фильтра. Результат: CCL13 способен индуцировать миграцию клеток THP-1. Мигрировавшие клетки THP-1 в нижней камере при увеличении ×100 представлены на рисунке 1. Статистические данные подсчета мигрировавших клеток в пяти случайно выбранных полях зрения каждой камеры при увеличении ×400 приведены на рисунке 2.