Active Perforin 1 (PRF1) (APB317Mu01)

Перфорин-1 (PRF1) представляет собой формирующий поры цитолитический белок, содержащийся в гранулах цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и NK-клеток. После дегрануляции перфорин связывается с плазматической мембраной клетки-мишени и в зависимости от концентрации ионов Ca2+ олигомеризуется с образованием пор, обеспечивающих пассивную диффузию семейства проапоптотических протеаз (гранзимов) в клетку-мишень. Активность рекомбинантного PRF1 оценивали методом гемолиза эритроцитов. Общая процедура включала двукратное разведение рекомбинантного мышиного PRF1 0,9% раствором NaCl, внесение в каждую лунку 50 мкл серийного разведения PRF1, 10 мкл 0,1 М CaCl2 и 50 мкл 0,25% суспензии эритроцитов кролика (RaE) с последующим осторожным перемешиванием. В контрольные лунки вместо PRF1 добавляли 50 мкл 0,9% NaCl. Планшет инкубировали в течение 20 ч при 37 °C в атмосфере 5% CO2. Результаты представлены на рис. 1; минимальная эффективная концентрация PRF1 составила 2,5 мкг/мл.