Active Perforin 1 (PRF1) (APB317Mu02)

Перфорин 1 (PRF1) представляет собой формирующий поры цитолитический белок, содержащийся в гранулах цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и NK-клеток; после дегрануляции он связывается с плазматической мембраной клетки-мишени и в присутствии ионов Ca2+ олигомеризуется с образованием пор, обеспечивающих пассивную диффузию проапоптотических протеаз (гранзимов) в клетку-мишень. Активность рекомбинантного PRF1 оценивали в тесте на гемолиз эритроцитов. Общая процедура включала двукратное разведение рекомбинантного мышиного PRF1 в 0,9% растворе NaCl, внесение в лунки 50 мкл серийных разведений PRF1, 10 мкл 0,1 М CaCl2 и 50 мкл 0,25% суспензии эритроцитов кролика (RaE) с осторожным перемешиванием; в контрольные лунки вместо PRF1 добавляли 50 мкл 0,9% NaCl. Планшет инкубировали в течение 20 ч при 37 °C в атмосфере 5% CO2. Результаты представлены на рисунке 1; минимальная эффективная концентрация PRF1 составила 5 мкг/мл.