Active Perforin 1 (PRF1) (APB317Ra01)

Перфорин 1 (PRF1) представляет собой формирующий поры цитолитический белок, содержащийся в гранулах цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и NK-клеток. После дегрануляции перфорин связывается с плазматической мембраной клетки-мишени и олигомеризуется в Ca2+-зависимом режиме, образуя поры, через которые осуществляется пассивная диффузия семейства проапоптотических протеаз - гранзимов - в клетку-мишень. Активность рекомбинантного PRF1 оценивали по лизису эритроцитов с помощью гемолиза. Общая процедура включала двукратное разведение рекомбинантного крысиного PRF1 в 0,9% NaCl, внесение 50 мкл серийных разведений PRF1 и 10 мкл 0,1 М CaCl2 в каждую лунку, после чего добавляли 50 мкл 0,25% суспензии кроличьих эритроцитов (RaE) и осторожно перемешивали. В контрольные лунки вместо PRF1 вносили 50 мкл 0,9% NaCl. Планшет инкубировали в течение 20 часов при 37 °C в атмосфере 5% CO2. Результаты представлены на рисунке 1. Минимальная эффективная концентрация PRF1 составила 7,5 мкг/мл.