Active Prokineticin 2 (PK2) (APA115Hu02)

Прокинетин 2 (PK2) представляет собой секретируемый белок из семейства прокинетиков, обладающий способностью вызывать мощное сокращение гладкой мускулатуры желудочно-кишечного тракта. Считается, что эти белки участвуют в ряде важных физиологических процессов, таких как нейрогенез, развитие тканей, ангиогенез и ноцицепция. К другим значимым физиологическим функциям Bv8/прокинетиков (PKs) относят их вовлеченность в развитие рака, репродуктивные процессы, а также регуляцию функций, влияющих на циркадные ритмы (секреция гормонов, пищевое поведение и цикл сон/бодрствование). Для оценки влияния PK2 на пролиферацию клеток клетки колоректального рака HCT116 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 5000 клеток на лунку и оставляли для адгезии; после этого среду заменяли на бессывороточную и инкубировали в течение ночи, затем среду меняли на стандартную среду DMEM с добавлением 2% сыворотки, содержащую рекомбинантный человеческий PK2 в различных концентрациях. После 96 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли по 10 мкл раствора CCK-8, затем после инкубации планшета в течение 1–4 часов при 37°C измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на планшетном ридере. На Рисунке 1 показана пролиферация клеток HCT116 после 96-часовой инкубации с PK2, наблюдаемая с помощью инвертированного микроскопа. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа CCK-8 (Cell Counting Kit-8) после 96-часовой инкубации с рекомбинантным PK2; результаты представлены на Рисунке 2. Было очевидно, что PK2 достоверно повышал жизнеспособность клеток HCT116. (A) Клетки HCT116, культивируемые в среде DMEM и стимулированные 100 нг/мл PK2 в течение 96 ч; (B) Нестимулированные клетки HCT116, культивируемые в среде DMEM в течение 96 ч.

На рисунке представлена пролиферация клеток HCT116 после стимуляции белком PK2.