Active Regenerating Islet Derived Protein 3 Beta (REG3b) (APK541Mu01)

Белок REG3b (также известный как PAP-I и HIP) представляет собой бактерицидный лектин C-типа, активный в отношении ряда грамположительных и грамотрицательных кишечных бактерий. Белки семейства Reg участвуют в различных физиологических процессах, выступая в качестве белков острой фазы, лектинов, а также факторов выживания и роста для инсулин-продуцирующих бета-клеток поджелудочной железы, нервных клеток и эпителиальных клеток пищеварительной системы. Для оценки влияния REG3b на пролиферацию клеток линии SK-N-SH клетки высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 5000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем среду заменяли на бессывороточную стандартную среду DMEM перед добавлением REG3b в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37°C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на планшетном ридере. Результаты оценки пролиферации клеток SK-N-SH после 72-часовой инкубации с REG3b, полученные с помощью инвертированного микроскопа, представлены на рисунке 1.

На рисунке 2 представлена дозозависимая кривая действия REG3b. Было показано, что REG3b достоверно стимулирует пролиферацию клеток линии SK-N-SH. Значение ED50 для данного эффекта составляет 3,685–84,37 нг/мл.