Active Secondary Lymphoid Tissue Chemokine (SLC) (APB575Hu01)

Вторичный лимфоидный хемокин (SLC) представляет собой недавно идентифицированный CC-хемокин, конститутивно экспрессируемый в различных лимфоидных тканях и являющийся мощным специфическим хемоаттрактантом для лимфоцитов. Для оценки хемотаксического эффекта SLC на линию клеток лейкоза Т-лимфоцитов человека Jurkat использовали анализ хемотаксиса с применением 24-луночной системы микрохемотаксиса. Кратко: клетки Jurkat высевали в верхние камеры (100 мкл клеточной суспензии, 10⁶ клеток/мл в среде RPMI 1640 без добавления фетальной бычьей сыворотки), а SLC (1 нг/мл, 15 нг/мл и 150 нг/мл, разведенные отдельно в среде RPMI 1640 без сыворотки) добавляли в нижние камеры; разделение камер осуществлялось с помощью поликарбонатного фильтра с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37 °C в атмосфере 5% CO₂ в течение 1 ч фильтр удаляли, затем клетки в нижних камерах наблюдали под инвертированным микроскопом при малом увеличении (×100), а количество мигрировавших клеток подсчитывали при большом увеличении (×400) случайным образом (пять полей зрения на каждый фильтр). Результаты показали, что SLC способен индуцировать миграцию клеток Jurkat. На Рисунке 1 представлены мигрировавшие клетки Jurkat в нижних камерах, наблюдаемые при малом увеличении (×100). Для каждого образца случайным образом выбирали пять полей зрения, после чего проводили подсчет мигрировавших клеток при большом увеличении (×400). Статистические результаты представлены на Рисунке 2. Оптимальная хемотаксическая активность SLC наблюдается в диапазоне концентраций 15–150 нг/мл. (A) Клетки Jurkat высевали в верхние камеры, а в нижние камеры добавляли среду RPMI 1640 без сыворотки, содержащую 150 нг/мл SLC; затем после 1 ч инкубации клетки в нижних камерах наблюдали при малом увеличении (×100). (B) Клетки Jurkat высевали в верхние камеры, а в нижние камеры добавляли среду RPMI 1640 без сыворотки, не содержащую SLC; затем после 1 ч инкубации клетки в нижних камерах наблюдали при малом увеличении (×100). Хемотаксический эффект SLC на клетки Jurkat.

На рисунке представлен хемотаксический эффект SLC на клетках Jurkat.