Active Superoxide Dismutase 1 (SOD1) (APB960Ra01)

Супероксиддисмутаза 1 (SOD1) - фермент, кодируемый геном SOD1 у человека и принадлежащий к семейству супероксиддисмутаз (SOD). SOD представляют собой антиоксидантные ферменты, катализирующие дисмутацию двух супероксид-радикалов с образованием пероксида водорода и кислорода. Согласно отчету, в слабо щелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана-HCl пирогаллол подвергается автоокислению на воздухе, которое ингибируется SOD; данный принцип был использован для измерения активности рекомбинантной SOD1 крысы. Реакцию проводили путем добавления 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола к 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl с последующим быстрым перемешиванием при 25 °C и регистрацией оптической плотности при 325 нм (в качестве холостого контроля использовали 50 ммоль/л Tris-HCl) в кинетическом режиме в течение 3 минут на микропланшетном ридере, контролируя скорость автоокисления пирогаллола на уровне 0,70 ед. оптической плотности/мин. Различные концентрации рекомбинантной SOD1 крысы вносили в 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl, инкубировали 20 мин при 25 °C, после чего в каждую лунку добавляли 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола, быстро перемешивали и регистрировали показания при 325 нм в кинетическом режиме в течение 3 минут. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование автоокисления пирогаллола в минуту. Удельная активность рекомбинантной SOD1 крысы составила 88,9 Ед/мг.