Active Superoxide Dismutase 1 (SOD1) (APB960Rb01)

Супероксиддисмутаза 1 (SOD1) - фермент, кодируемый геном SOD1 у человека и принадлежащий к семейству супероксиддисмутаз (SOD). Данные ферменты являются антиоксидантами, катализирующими дисмутацию двух супероксид-радикалов с образованием пероксида водорода и кислорода. Согласно отчету, в слабо щелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана-HCl (Tris-HCl) пирогаллол подвергается автоокислению на воздухе, которое ингибируется SOD; данный принцип был использован для измерения активности рекомбинантной кроличьей SOD1. Реакцию проводили путем добавления 8,5 мкл 5 ммоль/л пирогаллола к 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl с быстрым перемешиванием при 25 °C, после чего в кинетическом режиме в течение 3 минут регистрировали оптическую плотность при 325 нм (в качестве холостого контроля использовали 50 ммоль/л Tris-HCl), контролируя скорость автоокисления пирогаллола на уровне 0,70 ед. оптической плотности/мин. Различные концентрации рекомбинантной кроличьей SOD1 вносили в 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl, инкубировали 20 мин при 25 °C, затем в каждую лунку добавляли 8,5 мкл 5 ммоль/л пирогаллола, быстро перемешивали и регистрировали показания при 325 нм в кинетическом режиме в течение 3 минут. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование автоокисления пирогаллола в минуту. Удельная активность рекомбинантной кроличьей SOD1 составила 79 Ед/мг.