Active Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) (APB083Hu01)

Супероксиддисмутаза [Cu-Zn] внеклеточная (SOD2) - это фермент, кодируемый геном SOD2 у человека и принадлежащий к семейству супероксиддисмутаз (SOD). SOD представляют собой антиоксидантные ферменты, катализирующие дисмутацию двух супероксид-радикалов с образованием пероксида водорода и кислорода. Согласно отчету, в слабо щелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана-HCl (Tris-HCl) пирогаллол подвергается автоокислению на воздухе, которое ингибируется SOD; данный принцип был использован для измерения активности рекомбинантной человеческой SOD2. Реакцию проводили путем добавления 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола к 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl с последующим быстрым перемешиванием при 25 °C и кинетическим измерением оптической плотности при 325 нм в течение 3 минут на микропланшетном ридере (в качестве холостого контроля использовали 50 ммоль/л Tris-HCl), контролируя скорость автоокисления пирогаллола на уровне 0,70 ед. оптической плотности/мин. Различные концентрации рекомбинантной человеческой SOD2 вносили в 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl, инкубировали в течение 20 мин при 25 °C, после чего в каждую лунку добавляли 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола, быстро перемешивали и проводили кинетические измерения при 325 нм в течение 3 минут. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование автоокисления пирогаллола в минуту. Удельная активность рекомбинантной человеческой SOD2 составила 142,2 Ед/мг.